Этот анализ позволяет определить, насколько совпадают последовательности ДНК в супружеской паре. При нормальной беременности отцовские гены эмбриона, чужие для материнского организма, заставляют его вырабатывать защитную реакцию в отношении эмбриона. Если ДНК отца очень сильно совпадает с материнской, эмбрион может оказаться генетически почти одинаковым с материнским, и тогда материнский организм не распознает его как ребенка, и произойдет реакция отторжения.
1. Показания к определению иммунного статуса:
а. Два выкидыша или две неудачные попытки ЭКО
б. Недостаточный ответ яичников на стимуляцию овуляции (менее 6 яйцеклеток).
в. Гибель зиготы
г. Бесплодие неясного генеза
д. Диагностированные иммунологические проблемы (антиядерные антитела, ревматоидный артрит и/или системная красная волчанка)
е. Осложненный акушерский анамнез – задержка развития плода во время предыдущих беременностей.
ж. Один живой ребенок и повторные выкидыши при попытке вынашивания следующих беременностей
2. Иммунологические анализы.
HLA-типирование на примере II класса HLA DQA1.
Этот анализ позволяет определить, насколько совпадают последовательности ДНК в супружеской паре. При нормальной беременности отцовские гены эмбриона, чужие для материнского организма, заставляют его вырабатывать защитную реакцию в отношении эмбриона. Если ДНК отца очень сильно совпадает с материнской, эмбрион может оказаться генетически почти одинаковым с материнским, и тогда материнский организм не распознает его как ребенка, и произойдет реакция отторжения.
DQA1*20:1
В 2% случаев мужчина, имеющий DQ альфа 201, имеет и DQ бета 201. При оплодотворении яйцеклетки сперматозоидом с таким генотипом происходит гибель зиготы в 50%. Если только один DQ антиген (альфа или бета) является 201, вероятность образования такой зиготы в два раза меньше. Ни у одного мужчины, даже если имеется два DQ альфа 2-гена, не могут все сперматозоиды нести DQ бета 201 ген.
Когда гены DQ альфа 201 и бета 201 к эмбриону попадают от матери, эмбрион развивается нормально. Однако если эти гены (оба) приходят от отца, зигота гибнет. Поэтому на Земле не существует человека, имеющего оба DQ альфа 201 и бета 201 гена.
DQА1* 40: 1
У 89% людей с антителами к фосфолипидам либо имеется DQ А 4, либо близко совпадают значения DQ А у партнеров. Совпадение матери и ребенка по DQ альфа наблюдается при невынашивании беременности (наступившей или как неудачи ЭКО). При благополучном завершении беременности чаще наблюдается несоответствие по DQ между матерью и ребенком. Если у обоих родителей имеется DQ 4, у ребенка получается генотип DQ 4, 4. Некоторые из этих беременностей не ухудшают вероятность вынашивания второго ребенка, если только HLA G-молекулы у супругов не очень близки. Первый ребенок рождается после нормально протекавшей беременности, и единственная его проблема может заключаться в том, что он сам может быть родителем DQ 4, 4-ребенка и иметь проблемы с вынашиванием второго ребенка. К сожалению, первая DQ 4, 4 – беременность активирует киллерные клетки материнского организма и снижает уровень блокирующих антител. В результате вынашивание второй и последующих беременностей становится невозможным без применения лимфоцитоиммунотерапии для повышения уровня защитных антител и внутривенного введения гамма-глобулина для снижения уровня киллерных клеток.
При совпадении показателей DQ во время беременности назначают гепарин в качестве превентивной меры, даже если тест на антифосфолипидные антитела был отрицательным до беременности. Было показано, что при совпадении генов DQ у родителей, во время беременности может возникнуть резкий всплеск уровня антифосфолипидных антител. Если после 10 недель беременности уровень антител так и остается низким, гепаринотерапию отменяют.
Определение лейкоцитарных антител
С помощью этого анализа изучают выраженность иммунологической цепной реакции, вызванной совпадением DQ-антигенов. Низкие результаты этого анализа говорят доктору о необходимости назначить иммуноцитотерапию лимфоцитами мужа. Некоторые доктора назначают внутривенное введение гамма-глобулина. Другие предлагают просто подсаживать большее число эмбрионов, чтобы снизить вероятность сохранения именно того эмбриона, у которого произойдет полное совпадение DQ-антигенов. Обычно используют лимфоциты мужа. Однако если антигены DQ альфа у супругов очень близки, то используют лимфоциты донора. Эта терапия дает положительный результат, если уровень антител у женщины к Т- и В- лимфоцитам ее мужа превышает 30%, и положителен тест микроцитотоксичности.
Репродуктивный иммунофенотип (иммунограмма).
Этот анализ проводят для определения уровня естественных киллеров. В большинстве случаев наличие естественных киллерных клеток – хороший признак, поскольку они защищают организм от раковых опухолей. Однако бывают ситуации, когда их количество резко возрастает и убивает эмбрион или нарушает работу эндокринной системы, делая невозможным вынашивание беременности. При высоких уровнях естественных киллеров назначается внутривенное введение иммуноглобулина. Наоборот, при низких уровнях естественных киллеров доктора назначают стероидные гормоны, в частности, преднизолон.
При этом анализе определяют следующие типы клеток:
- CD3 (норма 63-86)
- CD4 (норма 31-53)
- CD8 (норма 17-35)
- CD19 (норма 3-8)
- CD56 (норма 3-12) (натуральные киллеры)
У 12% женщин с привычным невынашиванием беременности и у 25% с тремя и более неудачами ЭКО отмечен повышенный уровень натуральных киллеров высокая их цитотоксичность относительно клеток плаценты in vitro.
- CD3/IL2-R (норма 0-5)
- CD19/CD5 (норма 0-10). высокий уровень нарушает выработку необходимых для беременности гормонов.
- CD19+/CD5+ Чем выше их уровень, тем больше продукция антител к таким гормонам, как эстрадиол, прогестерон, ХГЧ, а также к серотонину и эндорфинам. Нужно определить уровень антител к гормонам, чтобы доктор мог назначить нужное количество недостающих гормонов. Тест на определение антител к прогестерону Вы можете проделать самостоятельно. Возьмите ампулу с прогестероном, разбейте и нанесите каплю на внутреннюю поверхность предплечья. Сверху закройте пластырем. Первая реакция (покраснение, опухание и уртикарные высыпания вокруг), вызванная антителами, появляется через 15 мин. Затем кожа бледнеет и возвращается в нормальное состояние, пока не наступит вторая реакция (обычно через 24 часа), вызванная работой CD19+/5+ клеток. Доложите о результатах своему доктору.
Антинуклеарные антитела
Эти антитела играют роль в патогенезе таких заболеваний, как ревматоидный артрит и системная красная волчанка а также могут приводить к невынашиванию беременности и бесплодию. Часто при этом обнаруживается титр антител 1:40 и выше при неоднородном паттерне. Такой паттерн нехарактерен для СКВ и РА.
Антитела к ДНК и гистонам
Если у женщины обнаруживаются антитела к гистонам, имеющие неоднородный паттерн, значит ее организм отторгает эмбрион.
Антитела к фосфолипидам
При положительных результатах этого анализа нарушается свертываемость крови у матери, образуются микротромбы, которые нарушают снабжение кровью ребенка. Также эти антитела являются причиной плохого прикрепления эмбриона в матке. Лечение – аспирин и гепарин. Эти препараты назначают еще до беременности, в течение цикла зачатия. Это лечение хорошо известно и широко применяется врачами, иногда они его назначают без проведения необходимых исследований, и выкидыш все равно происходит, поскольку причиной невынашивания могли быть другие иммунологические нарушения, требующие проведения иммуноцитотерапии лимфоцитами мужа, внутривенного введения иммуноглобулина или назначения преднизолона.
Другие исследования
К ним относится определение волчаночного антикоагулянта, антител к гормонам, антител к щитовидной железе. Перед введением иммуноглобулина нужно проведение аллергического теста на иммуноглобулины
Литература:
- Доброхотова Ю.Э., Джобава Э.М., Озерова Р.И. «Неразвивающаяся беременность: тромбоэмболические и клинико-иммунологические факторы:руководство.-М.:ГЭОТАР-Медиа,2010-144с.
- Кулаков, В.И. Лечение женского и мужского бесплодия / В.И. Кулаков // Вспомогательные репродуктивные технологии — настоящее и будущее / Под ред. В.И. Кулакова, Б.В. Леонова, Л.Н. Кузьмичева. -М.: МИА, 2005. - 591с.
- Сидельникова В.М. «Привычная потеря беременности», -М.: издательство «Триада-Х», 2005г.
- Определение наследственной предрасположенности к некоторым частым заболеваниям при беременности. Генетическая карта репродуктивного здоровья: методические рекомендации, под редакцией член-корреспондента РАМН,д.м.н. профессора Баранова В.С., академика РАМН,заслуженного деятеля науки РФ д.м.н. профессора Э.К. Айламазяна –СПб.: «Изд-во Н-Л», ООО, 2009г.-68с.
- Тетруашвили, Н.К. Соотношение цитокинов на ранних этапах гестации у больных с привычным выкидышем в анамнезе / Н.К. Тетруашвили, В.М. Сидельникова, В.Н. Верясов, Г.Т. Сухих // Мать и дитя: материалы IV Рос. науч. форума. – М., 2002. – С. 102
- Тетруашвили, Н.К. Привычное невынашивание беременности / Н.К. Тетруашвили // Клинические рекомендации. Акушерство и гинекология / Под ред. В.И. Кулакова. - М.: ГЭОТАР – Медиа, 2006. - Выпуск 2. – С. 35-71
- Тирская Ю.И., Е. Б. Рудакова, И. А. Шакина, М. А. Пилипенко, Е. А. Полторака, А. Е. Любавина «Синдром потери плода»; «Лечащий врач» №11 - 2009г, М.
